导演:德斯汀·克里顿,刘玉玲
主演:王浩歌,金雅娜,淳于珊珊,尹天照,徐少强,岳冬峰,孙亿舒,柏智杰
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SDS-PAGE凝胶电(diàn )泳,即(🥎)聚丙烯酰胺凝胶电泳,是生物化学和分子生物学(xué )实验中常用的蛋白质分(📤)离和鉴定技术,这项技(🛠)术的基本原理是利用蛋白(bái )质在电(diàn )场中(🍝)的(de )迁移率与其分子量成反比的关系,通过(guò )添加阴离(🗨)子洗涤(dí )剂SDS(十二烷基硫酸钠(nà ))(🙈)使蛋白质带上(shàng )负电荷,从而消除(chú )了蛋白质原有的电(diàn )荷差异,使得蛋白质的(🍈)迁(qiā(📑)n )移仅受其大小的影响。
操作步骤方面,首先需要制备适当浓度和pH值的聚(jù )丙烯酰胺凝胶,然后将(🎐)含有SDS和还原剂的蛋白质样品加入凝胶孔中,通电后,蛋白质开始根据大小分离(✏),小(xiǎo )分子蛋白质移动得更快,而大分子蛋白质则较慢,通过染色或(🎀)西(xī )方印迹等方法可以检测(cè )和(hé )分析蛋白质。
应用范(fàn )围广泛,SDS-PAGE不仅用于(yú )蛋白质分子量的测定,还广泛应用于蛋白质(zhì(🤔) )纯化程度(dù )的分析(🏕)、蛋白质变性和复性(🥌)研究以及蛋白质(zhì )-蛋白(bái )质相互作用的研究,它(tā )也(yě )是(shì )研究蛋白质翻(fān )译后修饰(shì )的重要工具。
尽管(guǎn )SDS-PAGE是一种强大(🈚)的(de )分析工具(jù(🦇) ),但它也有局(🙈)(jú )限性,对于极端大小(xiǎo )的蛋白质,分辨率可能会降(🏖)(jiàng )低;某些蛋白质可能因为(wéi )结(🗻)构的特殊性(🍕)而在凝胶中(zhōng )的迁移不符合预(yù )期,在(zài )进(🐉)行SDS-PAGE分析时,通常需要结合其他生化和分子(zǐ )生物学技术以(📇)获得更准确的(de )结果。
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